Una volta chì e cellule cultivemu

fabbrica di cellulesò contaminati, a maiò parte di elli sò difficiuli di trattà.Sì i celluli contaminati sò preziosi è difficiuli di ottene di novu, i seguenti metudi ponu esse usatu per sguassà.

1. Aduprate antibiotici

L'antibiotici sò più efficaci à tumbà i batterifabbriche di cellule.A medicazione cumminata hè più efficace chì a medicazione sola.A medicazione preventiva hè più efficace chì a medicazione dopu a contaminazione.A medicazione preventiva generalmente usa un antibioticu doppiu (penicillina 100u/mL più streptomicina 100μg/mL).Dopu a contaminazione, u metudu di pulizia deve esse da 5 à 10 volte più grande di a quantità di solitu.A droga deve esse usata da 24 à 48 ore dopu à l'aghjuntu, è poi rimpiazzatu cù a rutina di solitu.U fluidu di cultura.Stu metudu pò esse efficace in i primi fasi di a contaminazione.In più di a penicillina è a streptomicina, l'antibiotici utilizati ponu ancu include gentamicin, kanamycin, polymyxin, tetracycline, nystatin, etc. Comu cumunimenti usati sò 400 à 800 μg / mL kanamycin o 200 μg / mL tetracycline.U mediu hè cambiatu ogni 2 à 3 ghjorni è trasmissu per 1 à 2 generazioni per u trattamentu.In l'ultimi anni, hè statu infurmatu chì 4-fluoro, 2-hydroxyquinoline (Ciprofloxacin, Cip), derivati ​​​​pleu-romutilin (derivatu Pleu-romutilin, BM-Cyclin2: BM-1 è derivati ​​​​tetracycline (BM-2)) L'antibiotici sò efficace à tumbà i micoplasmi quandu sò usati solu o in cumminazzioni.Questi trè antibiotici sò tutti preparati in suluzioni cuncentrate 250X in PBS è guardati à -20 ° C per u usu dopu.A cuncentrazione di usu Cip hè 10 μg/mL, BM-1 hè 10 μg/mL, è BM-2 hè 5μg/mL.Quandu s'utilice, prima aspirate u mediu di cultura cuntaminatu, aghjunghje u mediu di cultura RPMI1640 chì cuntene BM-1, dopu aspirate u mediu di cultura dopu à 3 ghjorni, aghjunghje u mediu di cultura RPMI1640 chì cuntene BM-2, è a cultura per 4 ghjorni, è cusì per 3 ghjorni consecutivi. .rounds, finu à ch'ella hè pruvata da 33258 microscopia di tintura fluoriscente chì u micoplasma hè statu eliminatu, allura u mediu di cultura normale hè aghjuntu per a cultura è u passaghju 3-4 volte.

2. Trattamentu di riscaldamentu

L'incubazione di a cultura di tissuti contaminati à 41 ° C per 18 ore pò tumbà u micoplasma, ma hà effetti avversi nantu à e cellule.Per quessa, una prova preliminare deve esse realizatu prima di trattamentu per scopre u tempu di riscaldamentu chì pò tumbà u micoplasma à a massima misura è avè u minimu impattu nantu à e cellule.Stu metudu hè qualchì volta inaffidabile.Sè trattatu cù droghe prima è poi riscaldatu à 41 ° C, l'effettu serà megliu.

3. Aduprate serum specificu di mycoplasma

A contaminazione di Mycoplasma pò esse eliminata cù 5% serum immune di micoplasma di cunigliu (titru di hemaglutinazione 1: 320 o sopra).Perchè l'anticorpu specificu pò inibisce a crescita di mycoplasma, torna negativu 11 ghjorni dopu à u trattamentu antiserum è resta negativu 5 mesi dopu.hè negativu.In ogni casu, stu metudu hè più fastidiosu è micca cusì convenientu è ecunomicu cum'è l'usu di l'antibiotici.

4. Altri metudi

In più di i metudi sopra citati di caccià a contaminazione, ci sò ancu metudi di inoculazione è sterilizazione in animali, metudi di fagocitosi di macrophage, metudi di aghjunghje bromouracil à contaminatu.bottiglie di culturae poi li irradiating cù luce, è i metudi di filtrazione, etc., ma sò tutti più troublesome è inefficace.Dunque, una volta chì a contaminazione di micoplasma si verifica, salvu chì ùn hè di valore particularmente impurtante, hè generalmente scartata è ri-cultivata.

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